هنگامی که نیکون D300 برای اولین بار معرفی گردید بسیاری آن را بهترین دوربین نیمه حرفه ای موجود قلمداد کردند . اگرچه برخی از ویژگی های اضافه شده در مدل D300s قبلاً در مدل های دیگر دیده شده بود ( مانند افق مجازی در دوربین D3 و قابلیت فیلمبرداری در مدل D90 )اما ویژگی جدید اتوفوکوس بر اساس تشخیص کنتراست در حالت فیلمبرداری برای اولین بار در دوربین های SLR نیکون بکار رفته است . در زیر به برخی ویژگی های جدید این دوربین به نسبت دوربین D300 اشاره می کنیم : قابلیت فیلمبرداری 720p / 24 fps HD / قابلیت اتصال میکروفن استریو / سرعت عکسبرداری پیاپی 7 فریم در ثانیه / دو محفظه کارت حافظه CF و SD / حالت عکسبرداری کم صدا / دکمه LV اختصاصی / افق مجازی / قابلیت ویرایش فایل RAW درون دوربین ( تغییر سایز فایل ) منشور پنج وجهی منظره یاب / حسگر 12.3 از نوع CMOS با اندازه DX پردازشگر EXPEED / مدار اصلی به همراه پردازشگر مکان تقریبی 51 نقطه اتوفوکوس در قاب تصویر / ماژول حسگر 51 نقطه ای اتوفوکوس Multi-CAM 3500DX دوربین D300s از باطری گریپ MB-D10 استفاده می کند . این گریپ بدون خارج نمودن باطری دوربین از طریق کنتاکت های زیر دوربین متصل می شود . با این گریپ می توانید از باطری های EN-EL3E ، باطری پرظرفیت تر EN-EL4a و باطری های قلمی استفاده کنید . در صورت استفاده از باطری های قلمی یا باطری EN-EL4a سرعت عکسبرداری پیاپی 8 فریم در ثانیه خواهد بود . در پشت درب لاستیکی محفظه اتصالات ، محل نصب میکروفن ، اتصال A/V ، اتصال HDMI ، اتصال آداپتور برق و اتصال USB قرار دارند .در قسمت جلوی دوربین و سمت چپ آن محل اتصال سیم رابط فلاش استودیویی و محل اتصال کنترل راه دور یا دستگاه GPS وجود دارد که توسط درپوش لاستیکی محافظت می شوند . دوربین D300s دارای سیستم تمیز کننده حسگر همانند دوربین D300 می باشد . این سیستم با استفاده از خاصیت پیزوالکتریک باعث لرزش یک فیلتر محافظ شده تا غبارهای سبک از روی فیلتر جدا شوند .